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培養(yǎng)基種類和細胞培養(yǎng)基選擇

1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養(yǎng)，是目前應用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱非必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應各種已建成細胞系和不同地...

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細胞培養(yǎng)轉瓶和細胞工廠有哪些不同

近幾十年以來，隨著生命科技的快速發(fā)展，通過從動物組織中提取細胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)用以表達單克隆抗體、新藥開發(fā)等已成為普遍的技術。細胞的規(guī)模化擴培成為新的細胞培養(yǎng)需求，目前細胞擴增手段主要有：轉瓶培養(yǎng)、細胞工廠和生物反應器擴培三種方式。轉瓶培養(yǎng)所面臨的挑戰(zhàn)：轉瓶培養(yǎng)雖然投資少、結構簡單、技術成熟、擴增只需加轉瓶數(shù)量等優(yōu)點，但是占地空間大、勞動強度大、產(chǎn)率低、細胞生長密度低、瓶間差異較難控制等，難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)模化生產(chǎn)。生物反應器培養(yǎng)雖然可以大大提高細胞產(chǎn)率但是剪切力會降低細胞的活率...

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基因定點突變技術

體外定點突變技術是當前生物學各領域研究中的一種重要實驗手段，是改造、優(yōu)化基因的便捷方案，是探索啟動子調(diào)節(jié)位點的有效手段，也是研究蛋白質結構和功能之間的復雜關系的有力工具。蛋白質的結構決定其功能，二者之間的關系是蛋白質組研究的重點之一。對某個已知基因的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入，可以改變對應的氨基酸序列和蛋白質結構，對突變基因的表達產(chǎn)物進行研究有助于人類了解蛋白質結構和功能的關系，探討蛋白質的結構/結構域。CRISPR-Cas9系統(tǒng)的靶向雙鏈斷裂（DSB），基因組通常通...

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藥廠的清潔和消毒措施

對于制藥企業(yè)而言，當某一產(chǎn)品生產(chǎn)完畢后，總會有一些微生物和少許原輔料殘留于設備中，在溫度和濕度達到一定程度時，微生物能夠與原輔料中殘留有機物出現(xiàn)無法物化反應，通過大量繁殖能夠形成不同類型代謝物，這些代謝物會從一定程度上影響藥物藥效甚至會產(chǎn)生毒副作用，從而使制藥企業(yè)每當生產(chǎn)一段時間或者更換產(chǎn)品后會存在產(chǎn)品質量問題，因此無論維修設備或設備空閑一段時間，需要實現(xiàn)設備清潔工作。對于制藥企業(yè)來說，清潔主要針對設備中殘留的微生物或者各種代謝物，其總量在不影響藥品規(guī)定的質量、藥效及安全性。...

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CRISPR/Cas9 基因編輯和NGS驗證

CRISPR/Cas9基因編輯技術需要通過下一代測序(NGS)來驗證，能夠在核苷酸水平分辨率下進行大規(guī)模評估基因編輯的準確性和可靠性。高效、可自動化和可擴展的CIRCLE-seq是一種體外NGS測定，可以對CRISPR介導的切割進行靈敏的脫靶檢測。CRISPR/Cas9基因編輯技術CRISPR代表成簇規(guī)律間隔的短回文重復序列。這些重復的DNA片段最初來源于病毒病原體，并作為模板將CRISPR相關蛋白9(Cas9)核酸內(nèi)切酶引導至新入侵的病毒。當Cas9遇到同源病毒序列時，它會...

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