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常用細(xì)胞系大全-細(xì)胞分類-細(xì)胞來源與應(yīng)用場景一文講清

更新時(shí)間:2026-09-15點(diǎn)擊次數(shù):261
?? 目錄

什么是細(xì)胞系?

一句話定義:細(xì)胞系(Cell Line)是指從動物或人體組織分離出的細(xì)胞,經(jīng)過原代培養(yǎng)后能夠(或經(jīng)轉(zhuǎn)化后能夠)在體外持續(xù)傳代的細(xì)胞群體。與只能短期培養(yǎng)的原代細(xì)胞不同,細(xì)胞系可以長期凍存、復(fù)蘇和擴(kuò)增,是生命科學(xué)研究中標(biāo)準(zhǔn)化、可重復(fù)的實(shí)驗(yàn)材料。

細(xì)胞系按來源可分為人源細(xì)胞系(如 HeLa、HEK293)、嚙齒類細(xì)胞系(如 NIH-3T3、C2C12)以及其他物種細(xì)胞系(如非洲綠猴腎細(xì)胞 Vero、狗腎細(xì)胞 MDCK)。按生物學(xué)特性又可分為正常/永生化細(xì)胞系與腫瘤細(xì)胞系兩大類。下面按科學(xué)分類逐一整理。

?? 細(xì)胞系 vs 原代細(xì)胞
原代細(xì)胞直接來自機(jī)體組織,生物學(xué)特性接近體內(nèi)狀態(tài),但獲取困難、傳代能力有限(一般傳 5–10 代即衰老);細(xì)胞系經(jīng)永生化處理后可無限傳代,均一性好、成本低、易于標(biāo)準(zhǔn)化,是大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)選擇。對體內(nèi)真實(shí)性要求高的實(shí)驗(yàn)(如藥物毒理終評)仍建議結(jié)合原代細(xì)胞或體內(nèi)模型驗(yàn)證。

正常組織來源細(xì)胞系(永生化正常細(xì)胞)

這類細(xì)胞系保留了正常組織的部分生物學(xué)特性,常作為對照組、毒性評價(jià)模型或功能研究的基礎(chǔ)材料。

呼吸與上皮來源

細(xì)胞名稱簡稱典型用途
人支氣管上皮細(xì)胞BEAS-2B呼吸道毒理、肺癌發(fā)生機(jī)制研究中的正常對照
人支氣管上皮細(xì)胞16HBE氣道上皮轉(zhuǎn)運(yùn)、吸入制劑研究
小鼠肺泡巨噬細(xì)胞MH-S肺部免疫、吞噬功能研究
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞NR8383肺泡炎癥、納米材料毒性評價(jià)
小鼠乳腺上皮細(xì)胞MLE-12肺表面活性物質(zhì)、呼吸系統(tǒng)研究


肝臟與腎臟來源

細(xì)胞名稱簡稱典型用途
人正常肝細(xì)胞L-02(HL-7702)肝毒性評價(jià)、肝細(xì)胞功能研究的正常對照
人正常肝細(xì)胞QSG-7701 / Chang Liver肝代謝、藥物安全性評價(jià)
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞HK-2腎毒性、腎小管損傷機(jī)制研究
負(fù)鼠腎小管上皮細(xì)胞OK腎轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白與磷酸鹽代謝研究


其他正常組織來源

細(xì)胞名稱簡稱典型用途
人甲狀腺正常細(xì)胞Nthy-ori 3-1甲狀腺功能、甲狀腺癌對照
人乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A乳腺癌研究的正常對照
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞ARPE-19眼底病、視網(wǎng)膜退行性疾病研究
人子宮內(nèi)膜細(xì)胞HEC-1-A / Ishikawa子宮內(nèi)膜容受性、生殖醫(yī)學(xué)研究
人正常前列腺上皮細(xì)胞RWPE-1前列腺癌對照
小鼠成纖維細(xì)胞NIH-3T3 / BALB/3T3轉(zhuǎn)染測試、細(xì)胞毒性 MTT/CCK-8 實(shí)驗(yàn)經(jīng)典對照
小鼠前脂肪細(xì)胞3T3-L1脂肪分化、肥胖與代謝研究標(biāo)準(zhǔn)模型
人皮膚成纖維細(xì)胞BJ / HSF皮膚衰老、創(chuàng)傷修復(fù)、材料生物相容性
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF飼養(yǎng)層細(xì)胞、iPS 重編程研究
倉鼠肺細(xì)胞V79基因毒性、突變檢測(CHL/V79 系統(tǒng))
中國倉鼠卵巢細(xì)胞CHO重組蛋白/抗體藥物生產(chǎn)的核心工程細(xì)胞


腫瘤細(xì)胞系(按癌種分類)

腫瘤細(xì)胞系是癌癥機(jī)制研究、抗腫瘤藥物篩選中常用的體外模型。下表按癌種整理高頻使用株系。

呼吸系統(tǒng)腫瘤

細(xì)胞名稱簡稱亞型/特點(diǎn)
人肺腺癌細(xì)胞A549肺腺癌經(jīng)典株,使用頻率最高之一
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1299 / H1975 / H358 / H460 / H1650覆蓋 EGFR 等驅(qū)動基因突變背景(H1975 含 T790M/L858R)
人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H520 / H226 / H1703肺鱗癌模型
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H69 / H446 / H1688小細(xì)胞肺癌(SCLC)模型
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H460 / 95-D(高轉(zhuǎn)移)大細(xì)胞癌與高轉(zhuǎn)移模型
小鼠肺癌細(xì)胞LLC(Lewis 肺癌)小鼠移植瘤、轉(zhuǎn)移模型常用
人鼻咽癌細(xì)胞CNE-1 / CNE-2 / HNE-1鼻咽癌、EBV 相關(guān)研究
人喉癌細(xì)胞Hep-2喉鱗癌,也廣泛用于病毒受體研究


消化系統(tǒng)腫瘤

細(xì)胞名稱簡稱亞型/特點(diǎn)
人肝癌細(xì)胞HepG2 / Huh-7 / Hep3B / HCCLM3 / BEL-7402 / SMMC-7721 / PLC/PRF/5HepG2 亦常用于藥物肝毒性篩查;HCCLM3 為高轉(zhuǎn)移株
人胃癌細(xì)胞MGC-803 / SGC-7901 / BGC-823 / HGC-27 / AGS / MKN-45 / NCI-N87覆蓋胃腺癌、彌漫型等不同病理背景
人結(jié)直腸癌細(xì)胞HCT-8 / HCT-116 / HT-29 / LoVo / SW480 / SW620 / Caco-2 / DLD-1 / RKO / T84Caco-2 兼用于腸吸收模型;SW480/SW620 為原發(fā)-轉(zhuǎn)移配對
人胰腺癌細(xì)胞PANC-1 / MIAPaCa-2 / BxPC-3 / AsPC-1 / PANC02(小鼠)胰腺癌模型
人食管癌細(xì)胞KYSE-150 / KYSE-410 / TE-1 / TE-10食管鱗癌模型
人膽囊癌細(xì)胞GBC-SD / NOZ膽囊癌稀有模型


乳腺與婦科腫瘤

細(xì)胞名稱簡稱亞型/特點(diǎn)
人乳腺癌細(xì)胞MCF-7 / T47DER 陽性(腔面 A 型)
人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231 / MDA-MB-468 / BT-549 / HCC1937三陰性/基底樣型,侵襲性強(qiáng)
人乳腺癌細(xì)胞SK-BR-3 / BT-474HER2 陽性模型
小鼠乳腺癌細(xì)胞4T1 / EMT-6BALB/c 小鼠原位移植瘤、免疫健全模型
人宮頸癌細(xì)胞HeLa / SiHa / CaSki / C-33AHeLa 為一個(gè)人類永生化細(xì)胞系(1951 年);SiHa/CaSki 為 HPV16 陽性
人卵巢癌細(xì)胞A2780 / SK-OV-3 / OVCAR-8 / ID8(小鼠)卵巢癌化療敏感性研究
人絨毛膜癌細(xì)胞JEG-3 / JAR滋養(yǎng)層生物學(xué)、妊娠相關(guān)研究


泌尿與男性生殖系統(tǒng)腫瘤

細(xì)胞名稱簡稱亞型/特點(diǎn)
人前列腺癌細(xì)胞LNCaP / 22RV1(AR 陽性)、PC-3 / DU145(AR 陰性)雄激素依賴與去勢抵抗模型
人膀胱癌細(xì)胞5637 / T24 / UM-UC-3 / RT-112 / J82 / TCCSUP膀胱尿路上皮癌譜系
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞786-O / ACHN / Caki-1 / OS-RC-2腎癌與 VHL 通路研究
人睪丸支持細(xì)胞 / 精原細(xì)胞TM4 / GC-1 / GC-2生精功能與雄性生殖研究(正常永生化)


神經(jīng)、皮膚與骨組織腫瘤

細(xì)胞名稱簡稱亞型/特點(diǎn)
人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87MG / U251 / U118MG / LN-229 / SHG-44膠質(zhì)母細(xì)胞瘤主流模型
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y / SK-N-SH / Neuro-2a(小鼠)神經(jīng)分化(SH-SY5Y 可分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞)、神經(jīng)退行性疾病
人黑色素瘤細(xì)胞A375 / A875 / SK-MEL-1黑色素免疫治療研究熱點(diǎn)模型
小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16-F10高轉(zhuǎn)移株,免疫與轉(zhuǎn)移研究經(jīng)典
人骨肉瘤細(xì)胞U-2 OS / MG-63 / 143B / Saos-2骨腫瘤與骨形成研究(Saos-2 成骨特性好)
人舌鱗癌細(xì)胞CAL-27 / SCC-9 / SCC-25口腔鱗癌模型
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞RD軟組織肉瘤模型


內(nèi)分泌與其他

細(xì)胞名稱簡稱亞型/特點(diǎn)
人甲狀腺癌細(xì)胞CAL-62(未分化)/ B-CPAP(乳頭狀)/ TPC-1覆蓋甲狀腺癌主要病理亞型
大鼠胰島細(xì)胞INS-1 / RIN-m5f胰島素分泌、糖尿病研究經(jīng)典模型
小鼠胰島β細(xì)胞MIN6 / NIT-1β 細(xì)胞功能、1 型糖尿病模型


血液與免疫來源細(xì)胞系

血液系統(tǒng)腫瘤與免疫研究依賴懸浮培養(yǎng)的造血/免疫細(xì)胞系,是白血病分型研究、免疫治療(CAR-T 等)和藥物免疫調(diào)節(jié)評價(jià)的核心工具。

類別細(xì)胞名稱簡稱典型用途
T 淋巴細(xì)胞人 T 淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞JurkatT 細(xì)胞信號通路、CAR-T 體外驗(yàn)證常用
人 T 淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞CCRF CEM / MOLT-4T-ALL 研究、化療藥篩
人外周血 T 細(xì)胞H9 / HuT 78HIV/HTLV 病毒學(xué)研究
小鼠 T 淋巴瘤細(xì)胞EL4 / L1210小鼠免疫模型
B 淋巴細(xì)胞人伯基特淋巴瘤細(xì)胞Raji / Daudi / NamalwaB 細(xì)胞淋巴瘤、ADCC 效應(yīng)評價(jià)(Raji 為標(biāo)準(zhǔn)靶細(xì)胞)
人彌漫大 B 細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞SU-DHL-4 / U2932 / DB / OCI-LY 系列DLBCL 分子分型研究
小鼠 B 淋巴瘤細(xì)胞A20免疫健全小鼠淋巴瘤模型
髓系細(xì)胞人慢性髓系白血病細(xì)胞K-562伊馬替尼靶點(diǎn)(BCR-ABL)研究、NK 殺傷實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)靶細(xì)胞
人急性髓系白血病細(xì)胞HL-60 / NB-4 / THP-1 / U937 / MM.1S / MM.1R分化誘導(dǎo)(HL-60/NB-4)、AML 研究(THP-1 兼用于免疫炎癥)
人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞U266 / RPMI-8226 / NCI-H929骨髓瘤與蛋白酶體抑制劑研究
人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞U937單核/巨噬樣分化模型
巨噬細(xì)胞小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7 / Ana-1 / J774A.1炎癥、吞噬、免疫應(yīng)答研究三大常用株
人單核細(xì)胞白血病(THP-1 衍生)THP-1 源巨噬細(xì)胞PMA 誘導(dǎo)后廣泛用于炎癥因子與內(nèi)毒素模型
NK / 雜交瘤人 NK 細(xì)胞白血病NK-92NK 細(xì)胞殺傷機(jī)制、CAR-NK 研究


常用模式動物細(xì)胞系

除人源細(xì)胞外,小鼠、大鼠、倉鼠、猴、犬等模式動物來源細(xì)胞系在體內(nèi)可比性實(shí)驗(yàn)中不可替代。

小鼠來源(Mus musculus)

細(xì)胞名稱簡稱典型用途
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞NIH-3T3 / 3T3-L1 / MEF轉(zhuǎn)染、脂肪分化、飼養(yǎng)層
小鼠成肌細(xì)胞C2C12肌分化、縮與運(yùn)動醫(yī)學(xué)研究標(biāo)準(zhǔn)模型
小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1 / MLO-Y4(骨細(xì)胞)骨形成、骨材料研究
小鼠軟骨細(xì)胞ATDC5 / C28/I2(人軟骨)軟骨分化與退行性關(guān)節(jié)病
小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞GL261 / C6(大鼠)免疫健全膠質(zhì)瘤模型
小鼠肝癌細(xì)胞Hepa1-6 / BNL CL.2C57BL/6 小鼠肝癌移植瘤
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞CT26 / MC38腫瘤免疫治療模型(與 4T1、B16-F10 并列常用)
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞bEnd.3血腦屏障模型


大鼠、倉鼠與其他物種來源

物種細(xì)胞名稱簡稱典型用途
大鼠大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞PC-12神經(jīng)分化(NGF 誘導(dǎo))、神經(jīng)遞質(zhì)研究經(jīng)典模型
大鼠大鼠心肌細(xì)胞H9C2心肌缺血/再灌注、心臟毒性評價(jià)
大鼠大鼠成肌細(xì)胞L6骨骼肌代謝研究
大鼠大鼠腎小球系膜細(xì)胞HBZY-1腎病、腎纖維化研究
倉鼠中國倉鼠卵巢細(xì)胞CHO / CHO-K1抗體藥物工業(yè)生產(chǎn)選宿主細(xì)胞
倉鼠倉鼠腎細(xì)胞BHK-21疫苗生產(chǎn)(口蹄疫、狂犬病疫苗)
非洲綠猴非洲綠猴腎細(xì)胞Vero / COS-7Vero 為疫苗生產(chǎn)(脊灰、狂犬、新冠)與病毒分離金標(biāo)準(zhǔn);COS-7 用于轉(zhuǎn)染表達(dá)
恒河猴猴腎細(xì)胞LLC-MK2呼吸道病毒分離培養(yǎng)
犬狗腎細(xì)胞MDCK流感疫苗生產(chǎn)與流感病毒擴(kuò)增金標(biāo)準(zhǔn)
豬豬睪丸細(xì)胞 / 豬腎細(xì)胞ST / PK-15 / WKPMY-1獸用疫苗與豬源病毒研究
兔兔腎細(xì)胞RK-13兔源病毒研究
小鼠雪貂貂肺上皮細(xì)胞Mv1LuTGF-β 信號研究


主流細(xì)胞系與應(yīng)用場景速查

如果把常用細(xì)胞系比作實(shí)驗(yàn)室的"工具箱",以下幾株堪稱使用頻率最高的"明星工具",幾乎每個(gè)課題組都會接觸到:

?? HEK293 / 293T(人胚腎細(xì)胞)

轉(zhuǎn)染效率高,是基因功能研究、腺病毒/AAV/慢病毒包裝、重組蛋白瞬時(shí)表達(dá)的事實(shí)標(biāo)準(zhǔn)。293T 含 SV40 大 T 抗原,特別適合病毒載體生產(chǎn)。

?? HeLa(人宮頸癌細(xì)胞)

1951 年建立的第一株人類永生化細(xì)胞系,貢獻(xiàn)超過 10 萬篇論文。細(xì)胞分裂速度快、耐受性好,至今仍是基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)的主力模型。

?? CHO(中國倉鼠卵巢細(xì)胞)

全球上市單克隆抗體藥物中約 70% 由 CHO 表達(dá)生產(chǎn),是生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的"發(fā)動機(jī)"細(xì)胞,也是基因編輯與穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建的常客。

?? A549(人肺腺癌細(xì)胞)

肺癌研究、呼吸道病毒感染模型、吸入毒理實(shí)驗(yàn)的通用底物,與 BEAS-2B(正常對照)搭配構(gòu)成經(jīng)典的"正常-腫瘤"對照體系。

?? HepG2(人肝癌細(xì)胞)

兼具肝癌模型與"類肝細(xì)胞"代謝活性,是新藥肝毒性早期篩查的標(biāo)配,也常用于脂代謝與鐵死亡研究。

?? Vero / MDCK(疫苗生產(chǎn)細(xì)胞)

Vero 是世衛(wèi)組織推薦的病毒疫苗生產(chǎn)基質(zhì)細(xì)胞;MDCK 是流感疫苗與病毒擴(kuò)增的金標(biāo)準(zhǔn),支撐著全球季節(jié)性流感疫苗供應(yīng)。

細(xì)胞系培養(yǎng)基礎(chǔ)要點(diǎn)

不同細(xì)胞系的培養(yǎng)條件差異較大,但核心要素可歸納為五個(gè)方面。建議在接收新細(xì)胞系時(shí),第一時(shí)間核對細(xì)胞庫提供的培養(yǎng)方案。

  1. 培養(yǎng)基選擇:大多數(shù)貼壁細(xì)胞使用 DMEM(高糖/低糖)或 RPMI-1640(懸浮血液細(xì)胞),補(bǔ)充 10% 胎牛血清(FBS);疑難株系需參照說明書使用專用培養(yǎng)基(如脈絡(luò)膜內(nèi)皮、軟骨細(xì)胞)。

  2. 培養(yǎng)環(huán)境:常規(guī) 37℃、5% CO?、飽和濕度。原代樣與干細(xì)胞類對 CO? 濃度和培養(yǎng)基緩沖體系更敏感。

  3. 傳代與消化:貼壁細(xì)胞達(dá) 80–90% 融合度時(shí)用 0.25% 胰酶(含/不含 EDTA)消化;懸浮細(xì)胞直接離心換液。避免過度消化損傷膜蛋白。

  4. 凍存與復(fù)蘇:凍存液推薦 90% FBS + 10% DMSO,程序性降溫后轉(zhuǎn)入液氮(-196℃);復(fù)蘇時(shí) 37℃ 快速融化并盡快稀釋 DMSO,全程不超過 2 分鐘。

  5. 質(zhì)量控制:定期進(jìn)行支原體檢測、STR 身份鑒定,防止交叉污染——?dú)v史數(shù)據(jù)顯示約 15–20% 的細(xì)胞系存在錯(cuò)配或污染,HeLa 污染是重災(zāi)區(qū)。

?? 生物安全提醒
人源細(xì)胞系操作建議在生物安全柜(Ⅱ級 A2 型)內(nèi)進(jìn)行,并遵循實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)范。所有涉及病原感染實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng)(如病毒擴(kuò)增)須在相應(yīng)生物安全等級實(shí)驗(yàn)室開展。

細(xì)胞系選型建議:按實(shí)驗(yàn)?zāi)康钠ヅ?/h2>

選錯(cuò)細(xì)胞系是實(shí)驗(yàn)失敗最常見的原因之一。建議按"科學(xué)問題 → 物種匹配 → 亞型匹配 → 培養(yǎng)可行性"四步鎖定目標(biāo)細(xì)胞:

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/th>推薦細(xì)胞系組合說明
基因功能 / 信號通路HEK293T + 目標(biāo)疾病對應(yīng)腫瘤細(xì)胞(如 A549、MCF-7)293T 用于體系建立與載體驗(yàn)證,再遷移到疾病模型驗(yàn)證
抗腫瘤藥物篩選NCI-60 代表株或 A549 / HepG2 / HCT-116 / MCF-7 + 正常對照(L-02、BEAS-2B)腫瘤/正常配對評價(jià)選擇性毒性
腫瘤免疫 / CAR 類靶細(xì)胞(K-562 / Raji / Nalm-6 等)+ 效應(yīng)細(xì)胞(Jurkat / NK-92 / T 細(xì)胞)注意靶抗原表達(dá)驗(yàn)證
抗體 / 重組蛋白生產(chǎn)CHO-K1(穩(wěn)轉(zhuǎn))、HEK293(瞬時(shí)高表達(dá))工業(yè)放大選 CHO
病毒學(xué) / 疫苗Vero-E6 / MDCK / BHK-21 / ST 等按病毒嗜性選擇敏感細(xì)胞
神經(jīng)科學(xué)SH-SY5Y / PC-12(可分化)+ U87MG(膠質(zhì)瘤)+ bEnd.3(血腦屏障)分化方案需提前優(yōu)化
代謝與肥胖3T3-L1(脂肪分化)+ INS-1 / MIN6(胰島)+ HepG2(肝代謝)多器官聯(lián)動模擬代謝軸
骨與軟骨MC3T3-E1 / Saos-2(成骨)+ ATDC5(軟骨)+ RAW264.7(破骨分化)成骨-破骨平衡研究組合
小鼠體內(nèi)移植瘤免疫缺陷鼠:HepG2 / MCF-7 等人源株;免疫健全鼠:4T1 / CT26 / B16-F10 / LLC / GL261物種匹配是前提,人源細(xì)胞只能種到免疫缺陷小鼠


? 選型三原則
1)物種匹配:計(jì)劃做小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn),優(yōu)先選小鼠源或經(jīng)驗(yàn)證可移植的人源株;2)背景明確:關(guān)注分子分型(ER/HER2、EGFR 突變、HPV 陽性等)與文獻(xiàn)引用量;3)可培養(yǎng)性:評估本實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)條件與經(jīng)驗(yàn),疑難細(xì)胞先小規(guī)模試培養(yǎng)。

常見問題解答(FAQ)

細(xì)胞系和細(xì)胞株有什么區(qū)別?
嚴(yán)格來說,原代培養(yǎng)成功并傳代后即稱為"細(xì)胞系";從細(xì)胞系中通過克隆篩選或選擇獲得的、具有特定性狀或標(biāo)記的亞群稱為"細(xì)胞株(Cell Strain)"。日常使用中兩者常混用,購細(xì)胞時(shí)關(guān)注具體株系名稱即可。
初建實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該常備哪幾種細(xì)胞系?
建議常備"一快一穩(wěn)一對照":HEK293T(轉(zhuǎn)染快、好養(yǎng)活)、HeLa 或 NIH-3T3(穩(wěn)定傳代的練手細(xì)胞)、以及與研究方向匹配的疾病模型細(xì)胞加一個(gè)正常對照(如做肺相關(guān)研究配 A549 + BEAS-2B)。凍存庫建議每個(gè)株系至少保存兩個(gè)代次批次。
細(xì)胞為什么會支原體污染?如何發(fā)現(xiàn)?
支原體可通過血清、耗材、操作氣溶膠等途徑進(jìn)入培養(yǎng)體系,且不引起培養(yǎng)基渾濁,肉眼難察覺。典型表現(xiàn)是細(xì)胞生長變慢、形態(tài)異常、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)波動。常用檢測方法包括 DNA 熒光染色、PCR 檢測和培養(yǎng)法,建議新到細(xì)胞先隔離檢測、常規(guī)細(xì)胞每 1–3 個(gè)月檢測一次。
細(xì)胞傳代太多代會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果嗎?
會。腫瘤細(xì)胞系雖可"無限傳代",但長期高代次培養(yǎng)會積累遺傳與表型漂移,出現(xiàn)生長速度、藥敏特性的改變。建議記錄代次、使用低代次細(xì)胞(一般 P3–P20 內(nèi))完成關(guān)鍵實(shí)驗(yàn),并定期從液氮中復(fù)蘇新批次替換高代次細(xì)胞。
人源腫瘤細(xì)胞可以接種到普通小鼠體內(nèi)嗎?
不可以。人源細(xì)胞對小鼠是"異種",普通小鼠的免疫系統(tǒng)會將其排斥。人源腫瘤移植瘤模型需使用免疫缺陷小鼠(裸鼠、NOD/SCID、NSG);如需研究抗腫瘤免疫,則應(yīng)選擇免疫健全小鼠配同源小鼠細(xì)胞系(如 BALB/c 配 4T1、C57BL/6 配 B16-F10 或 MC38)。
如何避免用錯(cuò)細(xì)胞(細(xì)胞系身份錯(cuò)誤)?

從正規(guī)渠道獲取附有 STR 鑒定報(bào)告的細(xì)胞;接收后進(jìn)行 STR 比對確認(rèn)身份;培養(yǎng)過程中注意與文獻(xiàn)報(bào)道的形態(tài)、倍增時(shí)間比對。相關(guān)國際指南(如 ICLAC 數(shù)據(jù)庫)收錄了已知交叉污染的細(xì)胞系名單,購買前可查詢核對。


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